8904290122
61
دانشگاه علوم پزشكي گلستان
مركز تحقيقات علوم اعصاب
The protective role of vitamin C on the toxic effects of perinatal lead exposure on the hyppocampal neurons of the rats
بررسي اثر محافظتي ويتامين C در برابر اثرات سمي سرب بر روي نورون هاي هيپوكمپ در نوزادان موش صحرائي تيمار شده با سرب
سرب جزء فلزات سنگين بوده و بطور وسيع در طبيعت توزيع شده است و بعنوان يك آلوده كننده خطرناك شناخته مي شود. يكي از مكانهاي اصلي اثرات سمي آن، سيستم عصبي مركزي است. با توجه به اينكه آنتي اكسيدانتهايي از قبيل ويتامين C داراي نقش محافظتي در برابر مسموميت با سرب مي باشند، ولي تاكنون نقش محافظتي آن بر روي نورونهاي هيپوكمپ كه يكي از مكانهاي اصلي اثرات سمي سرب است مورد بررسي قرار نگرفته است كه در اين مطالعه با استفاده از تكنيك رنگ آميزي گلژي تغييرات مورفولوژيك نورون هاي
هيپوكمپ موشهاي مسموم با سرب و نقش محافظتي ويتامين C در برابر آن مورد بررسي قرار خواهد گرفت.
اثر محافظتي ويتامين C؛اثرات سمي سرب؛نورون هاي هيپوكمپ؛نوزادان موش صحرائي
1283558400
13
با توجه به مكانيسم استرس اكسيداتيو مسموميت با سرب، اخيرا شواهدي دال بر اثر محافظتي آنتي اكسيدانتهايي از قبيل ويتامين C در برابر مسموميت عصبي با سرب گزارش شده است . ولي تا كنون نقش محافظتي ويتامين C در مسموميت مزمن با سرب در نورونهاي هيپوكمپ مورد بررسي قرار نگرفته است كه هدف از اين مطالعه خواهد بود
الف) اهداف اصلي طرح:
تعيين اثر محافظتي ويتامين C بر روي مورفولوژي نورونهاي هيپوكمپ در برابر اثرات سمي سرب در پايان
شير خوارگي
ب) اهداف ويژه طرح:
1- تعيين اثر مسموميت مادرزادي با سرب بر روي اندازه جسم سلولي نورونهاي ناحيه CA1 هيپوكمپ در پايان شيرخوارگي
2 - تعيين اثر مسموميت مادرزادي با سرب بر روي وضعيت (تعداد انشعابات و طول) دندريتهاي نورونهاي ناحيه CA1 هيپوكمپ در پايان شيرخوارگي
3- تعيين اثر ويتامين C بر روي اندازه جسم سلولي نورونهاي ناحيه CA1 هيپوكمپ در مسموميت مادرزادي با سرب در پايان شيرخوارگي
4 - تعيين اثر ويتامين C بر روي وضعيت (تعداد انشعابات و طول) دندريتهاي نورونهاي CA1 هيپوكمپ در مسموميت مادرزادي با سرب در پايان شيرخوارگي
ج) هدف كاربردي: تعيين اثر محافظتي ويتامين C در برابر مسموميت مادرزادي با سرب
موشهاي ماده باردار با تاريخ معين شروع بارداري به سه گروه كنترل و مسموم با سرب و گروه سوم مسموميت با سرب داشته و ويتامين C دريافت مي كنند، تقسيم مي شوند. موشهاي كنترل آب آشاميدني معمولي دريافت كرده و موشهاي گروه مسموم روز 5 بارداري در آب آشاميدني خود استات سرب به ميزان 500 ميلي گرم در ليتر حل شده است دريافت مي كنند و گروه سوم همرا با استات سرب ويتامين C با غلظت 2 گرم در ليتر حل شده در آب دريافت مي نمايند اين تيمار تا پس از زايمان ادامه مي يابد. در روز 23 پس از زايمان 10 نوزاد نر از هر يك از گروه هاي با تكنيك Rapid Golgi مغز موش رنگ آميزي مي گردد. مراحل رنگ آميزي گلژي از به شرح زير است:
1. پرفيوژن transcardial با ســــرم فيــــزيولوژي و سپس70-50 ميلي ليتر فيكســـــاتور حاوي
پارافرمالدئيــد 1% و گلوتارآلدئيد 3% در بافر فسفات M 1/0 (4/7 PH=).
2. خارج كردن مغز، جدا كردن ناحيه مغز و قرار دادن آن در محلول بي كرومات پتاسيم.
3. شستشوي بلوك ها در محلول نيترات نقره و شستشوي بلوك ها با آب مقطر، آبگيري در الكل، قرار دادن نمونه ها در دو حمام پارافين، هر يك به مدت يك ساعت و قالب گيري با پارافين.
4. تهيه برش هاي 75 ميكروني با ميكروتوم روتاري، پارافين زدائي با گزيلل، قرار دادن برشها بر روي لام و لامل گذاري با استفاده از چسب انتالن.
و سپس با استفاده از ميكروسكوپ مجهز به دوربين ديجيتال از برشهاي ميكروسكوپي در برگيرنده هيپوكمپ فتوميكروگرافي به عمل مي آيد. نورونهاي مشخص شده در فتوميكروگرافها با استفاده از نرم افزار كامپيوتري مورد شمارش و آناليز مورفولوژيك قرار مي گيرند.
اندازه گيــري مسـاحت جسـم سلولي نورونهــا با استفـــاده از نــرم افزار Starter انجام ميشود. اندازه گيري شاخه هاي دندريتي و نحوه توزيع آنها در سه گروه آزمايشي با استفاده از روش دواير متحدالمركز شول (Sholl’s concentric circles technique) صورت ميگيرد.
ارزيابي تغييرات احتمالي در اندازه جسم سلولي و دندريتها با استفاده از آناليز واريانس (ANOVA) انجام ميشود و سطح معني دار بودن P=0.05 در نظر گرفته ميشود، نحوه توزيع شاخه هاي دندريتي بر اساس فاصله آنها از جسم سلولي در گروههاي كنترل، مسموم و مسموم+ ويتامين C با استفاده از تست ANOVA براي مقادير تكرارشونده (ANOVA test for repeated measures) بررسي ميشود. براي مقايسه فاصله دندريتها از مركز جسم سلولي تا حداكثر فاصلهاي كه براي تست آماري قابل اطمينان باشد از مقادير ميانگين استفاده ميشود.
34985000
دانشگاه علوم پزشكي گلستان
1283558400
0
بلي
بلي
فعال و منتشر شده
1309910400